治疗白癜风有那些偏方 http://m.39.net/pf/a_4658921.html本周分享文献：LiverImmuneProfilingRevealsPathogenesisandTherapeuticsforBiliaryAtresia，于年12月23日发表在Cell(IF=38.)上。
胆道闭锁(BiliaryAtresia，BA)是一种由肝外胆管梗阻导致的严重胆管病，可在婴儿早期引起病理性*疸和肝功能衰竭。BA的发病机制仍未完全阐明，尤其是免疫功能障碍对BA婴儿肝功能迅速衰竭的影响。本研究通过对6例BA、6例胆管囊肿(Choledochalcysts，CC)对照和4例非胆管病变对照中共,个免疫细胞进行单细胞转录组分析，观察BA患儿中各类细胞的病理变化，鉴定与BA相关的免疫变化，揭示BA的发病机理并探索B细胞修饰疗法对BA肝病病理的治疗效果。
本研究从肝活检和BA婴儿的血液中分析了单核免疫细胞(去除粒细胞)，并在单细胞分辨率下与对照组进行了比较。本研究共收集了,个高质量的免疫细胞(CD45+细胞，不包括粒细胞)单细胞转录组，鉴定了42个细胞亚群，同时通过T细胞和B细胞的单细胞V(D)J分析来鉴定与BA相关的免疫变化，并通过小鼠BA模型和临床研究验证B细胞修饰疗法的治疗效果。详细的研究路线如下：
详见原文图片摘要：本研究技术路线
BA患儿肝脏细胞*性增加，CX3CR1+CD8T效应细胞和NK细胞丰度降低，促进BA婴儿的肝纤维化
◆从血液和肝脏活检中鉴定出17种常规T细胞(CD4+和CD8+)和非常规T细胞(γδT和MAIT细胞)(图2A)。与对照组相比，BA婴儿肝组织中的细胞*性T辅助因子1(cTh1)和ex-cTh17细胞均显著增加，ex-cTh17和cTh1细胞的细胞命运转变趋势增加，且IL-17+γδT和IL-17+MAIT细胞中高表达IFN-γ，提示BA患儿肝脏炎症微环境的改变促进了Th17向Th1的转化。
◆对CD8T细胞、cir-NK和cir-NKT细胞群的分析发现表达CX3CR1的CD8T效应细胞(CD8Teff)、cir-NK和cir-NKT细胞比例显著降低，CX3CR1+CD8Teff细胞的丰度下降导致成纤维基因COL1A1和COL1A2的表达上升，从而激活肝星状细胞并促进纤维化。进一步通过RRV诱导的BA模型发现了CX3CR1-CX3CL1-介导的成纤维细胞死亡的减少可能导致BA婴儿的肝纤维化。
详见原文Figure2A：17种T细胞亚群
BA患儿肝巨噬细胞炎性和吞噬功能降低
◆研究人员鉴定出9个骨髓细胞亚型，发现BA婴儿的骨髓细胞炎症和趋化性明显受到抑制，Kupffer细胞中MARCO和CD5L表达降低(图4D，左)；体外实验证实BA婴儿的Kupffer细胞对荧光标记大肠杆菌的吞噬能力明显受损(图4E，右)。
◆表达相关性分析发现GPBAR1的表达与cAMP信号的激活呈正相关，抑制炎症基因的表达，表明胆汁酸的积累可能导致了BA婴儿肝髓细胞的低炎症。
详见原文Figure4D4E：肝内骨髓细胞的基因表达(左)、BA婴儿Kupffer细胞的吞噬能力减弱(右)
B淋巴细胞增殖和耐受性缺陷导致BA患儿自身反应性B细胞的增殖、自身反应性IgGs的积累
◆研究人员发现并证实出生后肝B淋巴细胞持续增殖，尽管CD10+B细胞(未成熟B细胞)的比例随着年龄的增长而下降，但B淋巴细胞至少在出生后的前四个月持续增殖(图5E)。
◆进一步发现B细胞活化因子(BAFF)浓度与肝脏中Sjogren综合征相关抗原A(Ro/SSA)特异性IgG浓度呈正相关，即BAFF能促进自身免疫性疾病患者IgG+自身反应性B细胞的存活和Ro/SSA特异性IgGs的积累。
详见原文Figure5E：新生儿B细胞和未成熟B细胞持续增殖但比例持续下降
B细胞修饰疗法改善了BA的肝脏病理
◆为了评估B细胞修饰疗法是否有可能改善BA导致的肝损伤，构建了RRV诱导的BA小鼠模型。结果发现与未治疗的RRV小鼠相比，用抗CD20抗体消耗B细胞或阻断MHC-I/II类介导的抗原呈递，小鼠体重显著改善，减少了*疸的发生，且治疗后的RRV小鼠肝门区周围淋巴细胞浸润减少，小叶结构更完整，肝纤维化减少。
◆采用利妥昔单抗(Rituximab，RTX)对4名BA患儿进行治疗，结果发现利妥昔单抗可有效削弱B细胞，抑制T细胞的细胞*性，并改善Kupffer细胞的清道夫功能。
本研究发现肝B淋巴细胞增殖在出生后并未停止。在RRV病*诱导的BA模型中，耗尽B细胞或阻断抗原呈递可改善肝损伤。在一项试点临床研究中，证明了利妥昔单抗可有效清除肝B细胞并将巨噬细胞、Kupffer细胞和T细胞的功能恢复到与对照组相当的水平。通过对患有BA的婴儿的全面免疫分析得出B细胞修饰疗法可能减轻肝脏病理。
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